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      應用案例
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      抗噬菌體L-蘇氨酸工程菌的選育及機理分析

      來源:   作者: 發布日期:2022-06-15 訪問量:3386

      本期為您推薦寧夏醫科大學王強老師研究團隊發表在知名期刊《飼料研究》上的一篇文章:抗噬菌體L-蘇氨酸工程菌的選育及機理分析。

       

      文章摘要內容如下:

      噬菌體是侵染細菌和放線菌的病毒,具有超顯微、無細胞結構、專性活細胞寄生等特征。噬菌體污染現象普遍在氨基酸發酵工業存在,會造成發酵周期延長、發酵產量降低、倒罐、經濟損失、浪費時間等問題。大腸桿菌YPT在發酵生產蘇氨酸過程中,有時會感染噬菌體,導致蘇氨酸產酸指標嚴重降低,增加蘇氨酸生產成本。因此,以YPT為出發菌,擬采用誘變篩選到1株抗噬菌體的突變株。常壓室溫等離子體(ARTP)是一種能夠在大氣壓下產生溫度在25~40 ℃、具有高活性粒子濃度的等離子體流,其富含的活性能量粒子對細菌的遺傳物質造成損傷,誘發生物細胞啟動SOS修復機制。SOS修復是一種高容錯率修復過程,修復過程中會產生種類豐富的錯配位點,最終穩定遺傳進而形成突變株。

      本研究通過常壓室溫等離子體誘變蘇氨酸生產菌,篩選獲得具有噬菌體抗性的蘇氨酸基因工程菌株。從蘇氨酸發酵染噬菌體發酵液中分離得到混合噬菌體(P-1)。以P-1為篩選因子,通過常壓室溫等離子體誘變蘇氨酸生產菌YPT、抗性初篩、溶原性驗證、噬菌體抗性遺傳穩定性驗證、發酵罐產酸等驗證。結果顯示:通過篩選得到1株對P-1具有穩定抗性的蘇氨酸生產菌株,命名為YPT-1。在分子水平上對突變株YPT-1抗噬菌體的機制做初步研究。采用CRISPR技術進行敲除驗證,證實fhuA基因的缺失可致使菌株獲得噬菌體抗性。研究表明,經過初步產酸驗證,此菌株產酸指標與對照株(誘變出發菌YPT)相比未下降,且產酸穩定,具有較好的工業化應用價值。

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      本期為您推薦寧夏醫科大學王強老師研究團隊發表在知名期刊《飼料研究》上的一篇文章:抗噬菌體L-蘇氨酸工程菌的選育及機理分析。

       

      文章摘要內容如下:

      噬菌體是侵染細菌和放線菌的病毒,具有超顯微、無細胞結構、專性活細胞寄生等特征。噬菌體污染現象普遍在氨基酸發酵工業存在,會造成發酵周期延長、發酵產量降低、倒罐、經濟損失、浪費時間等問題。大腸桿菌YPT在發酵生產蘇氨酸過程中,有時會感染噬菌體,導致蘇氨酸產酸指標嚴重降低,增加蘇氨酸生產成本。因此,以YPT為出發菌,擬采用誘變篩選到1株抗噬菌體的突變株。常壓室溫等離子體(ARTP)是一種能夠在大氣壓下產生溫度在25~40 ℃、具有高活性粒子濃度的等離子體流,其富含的活性能量粒子對細菌的遺傳物質造成損傷,誘發生物細胞啟動SOS修復機制。SOS修復是一種高容錯率修復過程,修復過程中會產生種類豐富的錯配位點,最終穩定遺傳進而形成突變株。

      本研究通過常壓室溫等離子體誘變蘇氨酸生產菌,篩選獲得具有噬菌體抗性的蘇氨酸基因工程菌株。從蘇氨酸發酵染噬菌體發酵液中分離得到混合噬菌體(P-1)。以P-1為篩選因子,通過常壓室溫等離子體誘變蘇氨酸生產菌YPT、抗性初篩、溶原性驗證、噬菌體抗性遺傳穩定性驗證、發酵罐產酸等驗證。結果顯示:通過篩選得到1株對P-1具有穩定抗性的蘇氨酸生產菌株,命名為YPT-1。在分子水平上對突變株YPT-1抗噬菌體的機制做初步研究。采用CRISPR技術進行敲除驗證,證實fhuA基因的缺失可致使菌株獲得噬菌體抗性。研究表明,經過初步產酸驗證,此菌株產酸指標與對照株(誘變出發菌YPT)相比未下降,且產酸穩定,具有較好的工業化應用價值。

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