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      應用案例
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      甲醇高效生產吡咯喹啉醌的適應性進化策略及生物合成過程優化

      來源:   作者: 發布日期:2023-06-15 訪問量:2862

            本期為您推薦福建師范大學黃建忠教授研究團隊發表在《Biotechnology for Biofuels and Bioproducts》上的一篇文章:Adaptive evolutionary strategy coupled with an optimized biosynthesis process for the efficient production of pyrroloquinoline quinone from methanol. 該研究通過整合ARTP誘變、適應性實驗室進化和高通量篩選策略,獲得了一株高產吡咯喹啉醌的Hyphomicrobium denitrifcans FJNU-A26突變株,PQQ的濃度比原始菌株增加148%[1]

            吡咯喹啉醌(PQQ)是細菌脫氫酶的輔助因子,與線粒體形成、繁殖、生長和衰老等有關,由于其化學合成成本極高,微生物合成產率低,因此篩選有效菌株和開發動態發酵策略以提高PQQ的產量是滿足大規模工業生產要求的重要舉措。已開發了多種發酵策略及隨機誘變方法來提高各種甲醇利用細菌的PQQ產量,其中,常壓室溫等離子體誘變技術(ARTP)是一種新開發的全細胞物理誘變技術,其特征是比紫外線輻射或化學誘變劑具有更高的突變率,特別是對于具有復雜代謝途徑的生物。

            本研究通過整合ARTP誘變、適應性實驗室進化和高通量篩選策略,獲得了一株高產PQQ的突變株,即脫氮絲狀菌FJNU-A26。隨后使用單因素試驗和響應面法對發酵培養基進行系統優化,使PQQ濃度從1.02g/L提高到1.37 g/L。qRT-PCR的轉錄分析表明,突變體內參與PQQ生物合成的基因的表達顯著上調。此外,引入了一種新型的兩階段pH控制策略,以解決pH值對細胞生長和PQQ產生的抑制問題。與原始菌株相比,此組合策略能使PQQ的濃度增加148%,在5 L發酵罐中進行144 h的分批補料發酵后,PQQ濃度達到1.52g/L,產量為40.3 mg/g DCW。突變株FJNU-A26是工業生產PQQ的一個有效備用菌株,并且該集成策略的應用較易擴展至其他微生物中,以大規模生產PQQ。

      圖片1

      圖片2

      圖片3

      [1] Ren, Y., Yang, X., Ding, L. et al. Adaptive evolutionary strategy coupled with an optimized biosynthesis process for the efficient production of pyrroloquinoline quinone from methanol. Biotechnol Biofuels 16, 11 (2023).

      論文鏈接:  https://doi.org/10.1186/s13068-023-02261-y

       


            本期為您推薦福建師范大學黃建忠教授研究團隊發表在《Biotechnology for Biofuels and Bioproducts》上的一篇文章:Adaptive evolutionary strategy coupled with an optimized biosynthesis process for the efficient production of pyrroloquinoline quinone from methanol. 該研究通過整合ARTP誘變、適應性實驗室進化和高通量篩選策略,獲得了一株高產吡咯喹啉醌的Hyphomicrobium denitrifcans FJNU-A26突變株,PQQ的濃度比原始菌株增加148%[1]

            吡咯喹啉醌(PQQ)是細菌脫氫酶的輔助因子,與線粒體形成、繁殖、生長和衰老等有關,由于其化學合成成本極高,微生物合成產率低,因此篩選有效菌株和開發動態發酵策略以提高PQQ的產量是滿足大規模工業生產要求的重要舉措。已開發了多種發酵策略及隨機誘變方法來提高各種甲醇利用細菌的PQQ產量,其中,常壓室溫等離子體誘變技術(ARTP)是一種新開發的全細胞物理誘變技術,其特征是比紫外線輻射或化學誘變劑具有更高的突變率,特別是對于具有復雜代謝途徑的生物。

            本研究通過整合ARTP誘變、適應性實驗室進化和高通量篩選策略,獲得了一株高產PQQ的突變株,即脫氮絲狀菌FJNU-A26。隨后使用單因素試驗和響應面法對發酵培養基進行系統優化,使PQQ濃度從1.02g/L提高到1.37 g/L。qRT-PCR的轉錄分析表明,突變體內參與PQQ生物合成的基因的表達顯著上調。此外,引入了一種新型的兩階段pH控制策略,以解決pH值對細胞生長和PQQ產生的抑制問題。與原始菌株相比,此組合策略能使PQQ的濃度增加148%,在5 L發酵罐中進行144 h的分批補料發酵后,PQQ濃度達到1.52g/L,產量為40.3 mg/g DCW。突變株FJNU-A26是工業生產PQQ的一個有效備用菌株,并且該集成策略的應用較易擴展至其他微生物中,以大規模生產PQQ。

      圖片1

      圖片2

      圖片3

      [1] Ren, Y., Yang, X., Ding, L. et al. Adaptive evolutionary strategy coupled with an optimized biosynthesis process for the efficient production of pyrroloquinoline quinone from methanol. Biotechnol Biofuels 16, 11 (2023).

      論文鏈接:  https://doi.org/10.1186/s13068-023-02261-y

       


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